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发酵罐与大鼠房:红海素项目的双线攻坚

萧凡在发酵车间连续待了三十六个小时,眼里布满血丝,却死死盯着5000L发酵罐的显示屏——上面的溶氧量曲线像条挣扎的游鱼,在“50%”和“75%”之间剧烈波动,底层藻株的死亡率已经升到12%,这是中试启动以来最糟糕的一次数据。

“再把曝气频率调到每分钟3次,同时打开上层的辅助通气阀!”他对着对讲机喊,声音因缺水而沙哑。叶之澜正蹲在发酵罐底部的取样口旁,手里握着取样管,听到指令后立刻起身调整阀门。蒸汽从管道接口处溢出,烫得她手背一缩,却只是咬了咬唇,继续盯着取样管里的藻液——淡红色的液体里飘着几缕白色絮状物,那是缺氧死亡的藻株残骸。

这已经是中试的第五次尝试。前四次要么栽在溶氧不均上,要么卡在代谢产物的杂质问题上,康启生物的张工昨天已经发来消息,问是否需要暂停项目调整方案。萧凡知道,一旦暂停,不仅会影响后续资金拨付,还可能让绿研生物钻空子——上周有人在实验室门口看到绿研的张经理,手里拿着疑似设备参数的图纸,虽然没抓到实据,但足以让人警惕。

“取样结果出来了!”叶之澜拿着检测报告跑过来,脸上带着一丝惊喜,“溶氧量稳定在65%左右了,底层藻株死亡率降到3%,就是……成品浓度还是只有0.35毫克\/克,离0.4毫克\/克的标准还差一点。”

萧凡接过报告,指尖在“0.35”上反复摩挲。他想起小试时添加深海嗜热菌代谢产物后浓度的跃升,突然抬头:“是不是代谢产物的添加时机不对?之前我们是在发酵第7天加的,要不试试第5天,趁藻株还在对数生长期的时候加,说不定能提高转化率。”

叶之澜眼睛一亮:“我马上准备!之前提纯好的代谢产物还在冷藏柜里,现在加进去,刚好能赶上藻株的生长高峰。”

两人立刻行动。叶之澜去无菌室取代谢产物,萧凡则调整发酵罐的搅拌速度,把温度从25c调到26c——文献里说这个温度下,藻株对代谢产物的吸收效率会提高10%。当淡褐色的代谢产物溶液通过加料口注入发酵罐时,萧凡盯着显示屏上的浓度曲线,心脏几乎要跳出胸腔。

接下来的两天,两人轮流值守,每两小时取样一次。到了发酵第10天,检测报告上的数字终于让他们松了口气:成品浓度0.42毫克\/克,溶氧差控制在5%以内,褐化率0.8%。萧凡第一时间给陈教授和张工发了消息,张工很快回复:“明天带技术团队过去复核,没问题的话就启动第三期资金。”

复核那天,康启生物的技术团队围着发酵罐看了半天,还随机抽取了三份藻液样本检测,结果和萧凡团队提供的数据完全一致。张工拍了拍萧凡的肩膀:“萧工,你们这关算是过了!不过还有个问题——粗品的提纯成本太高,现在用的高效液相色谱法,算下来每克成本要8000块,这要是工业化生产,根本没利润。”

陈教授这时开口:“我们已经在和省生物研究所合作,叶之澜负责牵头,开发新的提纯工艺。之澜,你给张工说说进展。”

叶之澜拿出提前准备好的工艺图:“我们计划用‘盐析法+膜分离’的两步法。第一步用硫酸铵盐析,先去除60%的杂质,成本只要原来的1\/10;第二步用孔径0.1微米的陶瓷膜做分离,能把纯度提到99.5%以上,总成本能降低60%。现在已经做了三次小试,效果都不错,就是膜材料的采购还没定——国外的膜性能好,但价格太高,国内的膜价格便宜,不过稳定性还需要测试。”

张工点点头:“这个思路可行,康启生物之前和一家国产膜厂商合作过,他们的陶瓷膜质量不错,我可以帮你们牵线,下周安排对接。”

解决了提纯工艺的原材料问题,团队又马不停蹄地推进动物实验。省生物研究所的动物房在郊区,萧凡和叶之澜每周要跑两趟,和实验员一起准备大鼠的饲料、配置红海素溶液。实验用的SpF级wistar大鼠一共有120只,被分成6组,每组20只,其中5组是实验组,分别注射不同剂量的红海素溶液,1组是对照组,注射生理盐水。

“今天要给高剂量组的大鼠注射500毫克\/千克的红海素,你们得注意观察,要是有大鼠出现抽搐、拒食的情况,立刻记录下来。”省生物研究所的李教授一边给大鼠称重,一边叮嘱。叶之澜手里拿着记录表,紧张地看着萧凡给大鼠注射——针头很细,大鼠在固定器里轻轻挣扎,她忍不住屏住呼吸,直到针头拔出来,没有出血,才松了口气。

前两周,实验一切顺利。低剂量组和中剂量组的大鼠活动正常,进食量和饮水量都和对照组没差别。可到了第三周,高剂量组的大鼠开始出现异常——有3只大鼠的毛色变得干枯,进食量减少,还有1只出现了腹泻。叶之澜立刻把样本送到检测室,结果显示:大鼠的转氨酶指标比正常水平高了20%,这意味着肝脏可能受到了损伤。

“康启生物的法务已经来电话了,问要不要暂停实验。”陈教授在电话里的声音有些沉重,“还有,绿研的张经理不知道从哪听说了实验异常,在行业群里说我们的红海素有毒性,现在已经有两家合作方来问情况了。”

萧凡拿着检测报告,坐在动物房外的长椅上,心里像压了块石头。叶之澜走过来,递给他一瓶水:“我查了文献,wistar大鼠的肝脏代谢酶和人类不一样,对某些化合物的耐受性会更低。要不我们调整剂量,把高剂量组降到200毫克\/千克,同时加做人类肝细胞的体外实验,看看红海素对人类细胞有没有毒性。”

萧凡抬起头,眼里重新有了光:“好!就这么办。你负责联系细胞库,采购人类肝细胞,我来调整实验方案,再写一份澄清说明,把大鼠和人类的代谢差异讲清楚,发给合作方。”

调整后的实验很快有了结果。200毫克\/千克剂量组的大鼠转氨酶指标恢复正常,毛色和进食量也回到了正常水平。人类肝细胞实验更让他们惊喜——红海素不仅没有损伤肝细胞,反而能提高细胞内的抗氧化酶活性,比维生素E的效果还高3倍。叶之澜把实验数据做成报告,连同澄清说明一起发给合作方,之前的质疑声很快就消失了,绿研散布的谣言也不攻自破。

与此同时,提纯工艺的测试也取得了突破。国产膜厂商提供的陶瓷膜在连续使用100小时后,分离效率只下降了2%,稳定性完全符合要求。叶之澜用两步法提纯出的红海素成品,纯度达到99.7%,成本降到3200元\/克,比最初的方案降低了60%。张工拿到检测报告后,立刻安排了第三期资金的拨付,1000万很快到账,用于规模化生产车间的设计和设备采购。

这天晚上,萧凡和叶之澜留在实验室整理数据。窗外的月光透过窗户,洒在办公桌上的实验记录上,上面密密麻麻写满了参数和结果。叶之澜突然说:“你还记得第一次做小试的时候吗?我们连续熬了三个通宵,结果藻株全褐化了,当时我还哭了。”

萧凡笑了:“怎么不记得?你还说再也不想碰藻株了,结果第二天又最早到实验室。”

“那时候哪想到,我们能走到中试,还能和康启生物合作。”叶之澜看着培养箱里的藻株,眼里满是温柔,“不过我总觉得,这还不是终点。等规模化生产车间建起来,我们还要优化工艺,把成本再降一点,让红海素能用到更多地方——比如做成护肤品,或者加到保健品里,帮助更多人。”

萧凡点点头,打开电脑,调出规模化生产车间的初步设计图:“张工说明天会带设计院的人过来,和我们一起讨论车间的布局。发酵罐要按L的规格来建,还要留出走道和取样区,另外,提纯车间得单独隔开,避免污染。”

叶之澜凑过来看设计图,手指在屏幕上点了点:“这里可以加一个原料储存间,深海微量元素和代谢产物要分开存放,还有,废水处理系统也得考虑进去,不能污染环境。”

两人就这样一边讨论,一边修改设计图,不知不觉天已经亮了。实验室外传来脚步声,陈教授拿着一份文件走进来,脸上带着笑容:“省科技厅刚刚发来消息,我们的红海素项目入选了‘重点科技攻关项目’,能拿到200万的补贴,还能优先对接临床实验机构——等规模化生产完成,我们就能启动临床实验,离药品上市又近了一步。”

萧凡和叶之澜对视一眼,都从对方眼里看到了期待。他们知道,中试的成功只是一个新的开始,接下来还有规模化生产、临床实验、市场推广等无数个挑战等着他们。但就像之前一次次攻克难题那样,只要他们一起努力,一步一个脚印,总有一天,红海素会从实验室里的样品,变成真正能造福人类的产品。

阳光透过窗户照进来,落在培养箱里的藻株上,淡红色的藻液在晨光中轻轻晃动,像一团燃烧的小火苗,温暖而坚定。

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